Die Oststeirische Römerweinstraße beginnt in Gleisdorf am Hauptplatz und führt über die Kernstockgasse nach Hohenberg und weiter nach Gamling zur Bundesstraße 54. Nach ca. 2 km zweigt sie in Richtung Prebensdorfberg bzw. Nitschaberg ab. Über Prebensdorf geht es wieder zurück zur Bundesstraße 54. Hier führt sie in Richtung Pischelsdorf. Unmittelbar vor dem Ort zweigt sie in Richtung Romatschachen ab. Die Weiterführung erfolgt über Siegersdorf, St. Johann bei Herberstein in Richtung Stubenberg am See bis zur Abzweigung Schielleiten.
Von hier führt sie bis zur Abzweigung Schönegg, wo es steil bergauf - mit großartigen Ausblicken auf das gesamte oststeirische Hügelland - über den Schönauberg, ein kurzes Stück der Pöllauerstraße entlang in Richtung Hartberg geht. Nach Flattendorf zweigt sie nach Löffelbach ab und führt am Fuße des Ringkogels vorbei - mit den höchstgelegenen Weingärten - nach Hartberg, wo sie über Habersdorf, Schölbing, Mitterberg, St. Magdalena, Rohrbach nach Wagerberg führt und bei der Heiltherme Bad Waltersdorf endet.